針對食源性微生物污染引起的食品安全問題，卡尤迪生物為業(yè)界帶來了前沿的技術支持，和優(yōu)良的解決方案。為此，《食品安全導刊》記者采訪了卡尤迪生物科技有限公司副總經理單長輝先生。

　　記者：國內食品微生物檢測現(xiàn)狀如何?都有哪些檢測技術?

　　單長輝：在國內，食品受到食源性微生物污染現(xiàn)象比較嚴重，食源性致病菌對人體造成傷害甚至死亡，而且近年來微生物引起的食品安全問題呈逐年遞增態(tài)勢，廣大老百姓及政府部門對此也十分關注，一旦發(fā)生食源性微生物污染事件對食品企業(yè)的信譽和形象都會產生不利的影響，公眾對政府部門處置的能力也會產生質疑。目前檢測方法主要分為傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)方法和以金標、酶免和PCR為代表的快速檢測方法。

　　記者：食品微生物檢測，卡尤迪有何好的解決方案?

　　單長輝：由卡尤迪獨創(chuàng)的“一步法”免核酸提取熒光定量PCR技術平臺針對于各種食源性細菌和病毒，如大腸桿菌O175、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、李斯特菌、彎曲菌、諾如病毒等可以進行快速，準確的鑒定。利用卡尤迪“一步法”實時熒光定量PCR系統(tǒng)可以在大型實驗室、基層實驗室、現(xiàn)場進行食品病原微生物核酸檢測，其特點是不需要核酸提取步驟，靈敏度高。在不增菌的情況下直接檢測牛奶、雞蛋、肉類等食品中病原微生物，靈敏度可達102 cfu/mL，符合相關行業(yè)標準。對于國標中不得檢出的微生物，可以利用市售快速增菌培養(yǎng)基進行4~6小時的增菌過程，增菌過后直接檢測，可以達到相關要求。在食品微生物檢測中通常是定性檢測，卡尤迪“一步法” 實時熒光定量既可以進行定性檢測，又可以通過與標準品對比做到絕對定量與相對定量，定量范圍在檢出限102 cfu/mL以上。

　　記者：Mini8實時熒光定量PCR儀基于何原理快檢?

　　單長輝：基于的是熒光定量PCR的原理，PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;剛開始時, 探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時，Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產物形成完全同步。理論上只要加樣的樣本中有一個致病微生物便可以被檢測出來，具有極高的靈敏度，這就大大縮短了前增菌的時間，可以在4個小時左右達到國標不得檢出的標準。PCR是聚合酶鏈式反應,是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點，是能將微量的DNA大幅增加。理論上只需要有1個DNA分子就可以在1個小時的時間內擴增到數以億記的DNA分子，我們使用的熒光定量PCR是在PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;剛開始時, 探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時，Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號。這樣加入Taqman探針的熒光定量PCR具有極高的特異性，產生假陽性的幾率非常之低，保證了檢測的準確性。

　　記者：PCR儀相比同類產品有何亮點和競爭力?

　　單長輝：PCR的方法相對于傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法和快檢中的酶免金標等方法具有速度快、準確性高的特點，由于PCR所檢測的是微生物的核酸，而且能在1小時內大量擴增檢測，這是其他方法所做不到的，傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法時間往往需要2~3天，而酶免等方法也需要1天的時間，PCR方法在4~6個小時內完成檢測，時間上具有很大優(yōu)勢。在準確性上由于PCR方法檢測DNA片段的引物探針具有極高的特異性，在檢測的準確性上也要高于酶免金標等方法。

　　記者：Mini8實時熒光定量PCR儀有何特點與優(yōu)勢?

　　單長輝：Mini8便攜式熒光定量PCR儀，將PCR熱循環(huán)與熒光檢測和各種軟件算法有機結合，可實時觀察到PCR反應每次擴增中產物的動態(tài)變化。PCR之后，即可馬上得到定量結果，免去了傳統(tǒng) PCR后續(xù)的PCR產物純化，凝膠電泳分析等費時費力的環(huán)節(jié)。 通過采用創(chuàng)新性的光學檢測系統(tǒng)，Mini8能為用戶有效節(jié)約單個反應的試劑成本，反應體積可配置15~150UL，一個半小時左右即可得到精準的定量結果。此外，Mini8是市場上唯一一款可使用12V直流電源，可車載，可在移動環(huán)境使用的實時熒光定量PCR，非常適合現(xiàn)場檢測，針對突發(fā)食品安全事件具有不可比擬的優(yōu)勢。

　　記者：卡尤迪產品有何檢測的成功案例?分享給大家?

　　單長輝：在不增菌的情況下直接檢測牛奶、雞蛋、肉類等食品中病原微生物，從拿到樣本到出結果時間控制在90分鐘以內。如果進行快速增菌步驟，經過4小時的增菌，總的檢測時間控制在6小時以內。由于卡尤迪一步法技術平臺剛上市不久，在食品方面應用還不是很廣泛，但在檢驗檢疫、病毒檢測上應用十分廣泛，卡尤迪研發(fā)的基于一步法技術平臺的寨卡病毒檢測試劑已經在北京、浙江、上海、深圳、廣州、福建、遼寧等地檢驗檢疫局和疾病預防與控制中心得到了大面積的應用，可以直接在機場口岸等地對疑似病例進行現(xiàn)場檢驗。同時我們的一步法技術平臺在動物疫病檢測、癌癥篩查、個性化用藥指導、乙肝丙肝檢測、突發(fā)應急事件中得到了廣泛應用。

　　記者：卡尤迪產品的市場推廣情況與客戶評價如何?

　　單長輝：我們現(xiàn)在已經開發(fā)了部分食源性微生物檢測試劑盒，可以直接對復雜的食品樣本進行檢測，由于免去了復雜的核酸提取過程，在同類PCR產品中卡尤迪具有操作簡便、檢測時間短的優(yōu)勢，由于卡尤迪一步法技術平臺剛上市不久，在食品方面應用還不是很廣泛，但在檢驗檢疫、病毒檢測上應用十分廣泛，客戶的總體評價就是方便、快速、準確。如今在《食品安全導刊》媒體平臺的幫助下，把我們的產品推廣給了全國各級食監(jiān)部門、檢驗所、食品企業(yè)、流通、零售終端及更多用戶，使得我們的產品獲得了越來越廣泛的歡迎與贊譽。