液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法測定蔬菜中的滅蠅胺

　　

　　李 莉，劉苗苗，丁宗博，王海波，張興龍，魏亦山

　　

　?。ㄇ鄭u市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全中心，山東青島 266100 ）

　　

　　摘 要：本研究在標準方法《蔬菜中滅蠅胺殘留量的測定高效液相色譜法》（NY/T 1725-2009 ）的基礎(chǔ)上，省掉凈化 步驟，通過提取與濃縮，建立液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定蔬菜中的滅蠅胺分析方法。結(jié)果表明，采用簡化后的前處理方法 測定7種不同種類的樣品，在0. 01 - 1. 00 mg/L范圍內(nèi)，加標回收率為78% ~ 107%,標準偏差為2. 8% ~ 5.5%,其回收率 和精密度都能達到分析檢測要求。運用該方法對實際樣品進行分析，操作簡單，準確度高，可為蔬菜中滅蠅胺的批量快速 檢測方法研究提供數(shù)據(jù)參考。

　　

　　關(guān)鍵詞∶液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法;蔬菜;滅蠅胺

　　

　　滅蠅胺（Cyromazine）是一種三嗪類化合物，屬于強內(nèi)吸 性昆蟲生長調(diào)節(jié)劑，極性強，具有觸殺和胃毒作用。目前， 滅蠅胺被廣泛用于亜豆、菜豆、黃瓜和茄子等農(nóng)作物的雙翅 目昆蟲病蟲害防治中團。

　　

　　《食品安全國家標準食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2019）図規(guī)定，滅蠅胺殘留量指定的檢驗方法為《蔬 菜中滅蠅胺殘留量的測定高效液相色譜法》（NY/T 1725— 2009） [3]（以下簡稱標準方法），但該方法的前處理步驟煩瑣、 溶劑消耗量大，耗時長，不適用于大批量檢測工作。因此， 本研究通過簡化前處理步驟，建立了快速檢測滅蠅胺殘留的 樣品前處理方法，并釆用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析測 定，為不斷探尋更優(yōu)質(zhì)、更快速的檢測方法具有重要的指導 意義[4_5]o

　　

　　1材料與方法

　　

　　1.1儀器和試劑

　　

　　Agilent technologies 6460 Triple Quad LC/MS,配有 ESI 源，美國安捷倫公司；電子天平，奧豪斯有限公司；高速組 織搗碎機，德國IKA公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，德國KNF。

　　

　　滅蠅胺標準品，濃度為1 000 ng/mL,購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境 質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心（天津）；乙睛、甲醇、乙酸鉉、甲酸、 甲酸鉉（色譜純）；實驗用水為屈臣氏蒸饞水。

　　

　　大白菜、番茄、蔥、蒜、香菇、西葫蘆和山藥，均購自 于市場，經(jīng)檢測均為陰性樣品；結(jié)球甘藍為能力驗證剩余樣 品（已知添加濃度）。

　　

　　1.2標準溶液配制

　　

　?、贉缦壈窐藴蕛湟海阂迫? 000 mg/L滅蠅胺標準溶 液ImL于100 mL容量瓶中，用乙臘稀釋至刻度，濃度為 10 mg/L。②滅蠅胺標準中間液：移取ImL標準儲備液加 入乙臘，定容至10 mL,配制成1 mg/L標準中間液。③滅 蠅胺標準工作液：吸取100 gL標準中間液，加入900 gL空 白基質(zhì)，配制成0.1 mg/L的基質(zhì)標液。

　　

　　1.3液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀器條件

　　

　　1.3.1色譜條件

　　

　　色譜柱：Infinity Lab Proshell 120 EC -C18 （2.7 pirn,

　　

　　3.0x100 mm）；流動相：A-水（含5nmol/L甲酸鉉+0.1%甲 酸）、B-甲醇；梯度洗脫程序見表1,流速為0.4mL/min, 進樣體積2gL,柱溫40 °C。

　　

　　1.3.2質(zhì)譜條件

　　

　　離子源：AJS-ESI；掃描方式：正離子掃描；干燥氣溫 度：285 P；干燥氣流速：10 L/min；鞘氣溫度：375 °C； 鞘氣流速：12 L/min；霧化器35 psi；監(jiān)測模式：多反應(yīng)監(jiān)測 模式（MRM）；定量/定性離子對：167.1/85.K 167.1/68.1« 1.4樣品前處理

　　

　　準確稱取粉碎混勻后的試樣20 g（精確到0.01 g）,加 入乙酸鉉-乙臘（1+4）溶液均質(zhì)、沖洗、過濾，并定容至 100 mL具塞比色管中。用移液管準確移取10 mL提取液至 圓底燒瓶中，旋蒸濃縮至只含水的溶液（冷凝裝置無液滴滴 下）。將只含水的溶液轉(zhuǎn)移至帶刻度線的10 mL樣品小管， 加水定容至5mL,混勻過0.22呻濾膜，上液相色譜-串 聯(lián)質(zhì)譜儀測定。

　　

　　與標準方法相比，省去了凈化步驟，僅保留提取和濃縮 步驟。

　　

　　1.5加標回收試驗

　　

　　選取大白菜、番茄、蔥、蒜、香菇、西葫蘆和山藥7種 空白基質(zhì)，添加0.1 mg/L的標準溶液，平行測定6份，按 上述前處理方法處理后上機測定，計算回收率和精密度。

　　

　　2結(jié)果與分析

　　

　　2.1線性范圍

　　

　　研究分析發(fā)現(xiàn)，滅蠅胺在0.01?1.00 mg/L范圍內(nèi)有良 好的線性關(guān)系，線性方程為尸16.311 8x（其中，'為響應(yīng)值； x為滅蠅胺的濃度，mg/L）,線性相關(guān)系數(shù)r為0.999 4。

　　

　　2.2定量限

　　

　　選取大白菜、香菇、蒜空白基質(zhì)，添加濃度為0.010mg/L 的標準溶液，用上述方法平行測定6次，測得其平均回收率 分別為 92%、72%、75%, RSD 分別為 4.6%、5.4%、7.6%, 其準確度和精密度符合檢測要求，因此，將0.01 mg/L作為 此方法滅蠅胺的定量限。

　　

　　2.3回收率和精密度

　　

　　7種不同基質(zhì)的加標回收和精密度結(jié)果見表2。從表2 可以看出，在7種不同種類的基質(zhì)中，滅蠅胺的回收率比較 穩(wěn)定，在78%?107%范圍內(nèi)，符合準確度要求；同時， RSD在2.8%?5.5%,符合精密度要求，滿足檢測分析要求。

      2.4實際樣品分析

　　

　　將能力驗證的樣品結(jié)球甘藍(已知添加滅蠅胺的濃度為

　　

　　0.140 mg/L)用上述方法進行前處理后上機測定，測得其結(jié) 果為 0.147 mg/L。

　　

　　3結(jié)論

　　

　　本研究通過改進標準方法中的前處理步驟，僅通過提取 和濃縮，省略了凈化步驟，建立了測定蔬菜中滅蠅胺殘留量 的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法。該方法簡單，快速、準確可靠, 既可滿足蔬菜中滅蠅胺殘留的技術(shù)要求，又可用于大量樣品 的快速檢測。但是，由于省掉了凈化步驟，提取出的基質(zhì)會 比標準方法更復雜，對色譜柱和儀器的污染程度會更高一 些。因此，在平時的檢測過程中，要更加注意色譜柱的沖洗 和儀器的維護保養(yǎng)。

　　

　　參考文獻

　　

　　[1]劉瑛，余晟，于峰，等.滅蠅胺的毒性研究[J].農(nóng)藥,2000, 39(9):25-33.

　　

　　[2]國家衛(wèi)生健康委員會，中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部，國 家市場監(jiān)督管理總局.食品安全國家標準食品中農(nóng)藥最大殘 留限量：GB 2763—2019[S],北京：中國農(nóng)業(yè)出版社＞2019.

　　

　　[3]中華人民共和國農(nóng)業(yè)部.蔬菜中滅蠅胺殘留量的測定高 效液相色譜法:NY/T 1725-2009[S].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社2009.

　　

　　[4]趙馨.QuEChERS方法在HPLC測定血豆中滅蠅胺殘 留量的應(yīng)用研究[J],福建農(nóng)業(yè)科技＞2020(8):7-12.

　　

　　[5]徐軍，張盈，董豐收，等.超高效液相色譜-串聯(lián) 質(zhì)譜法快速檢測菜豆及土壤中的滅蠅胺殘留[J].農(nóng)藥學學 報,2012,14(6):654-658.